Importance de la méthylation m6A de l’ARN dans la fonction de la cellule β pancréatique et lors du diabète de type 2

Abstract

Récemment des études ont montré le rôle fondamental de l’épitranscriptome, des modifications réversibles de l’ARN, dans l’identité et la fonction de la cellule β pancréatiques. Dans cette étude le rôle et les mécanismes de régulation de la méthylation m6A de l’ARN, dans la cellule β et au cours du DT2 seront étudiés dans des modèles animaux et chez l’homme.La méthylation m6A est quantifiée dans des lignées cellulaires β pancréatiques, des îlots pancréatiques murins et îlots humains diabétiques ou non, après différents traitements par dot blot, immunofluorescence et spectrométrie de masse. En parallèle, l’expression des enzymes régulant la marque m6A est évaluée dans les même modèles. Le rôle des enzymes au sein de la cellule bêta est évalué par utilisation d’inhibiteurs et de siRNA dans nos lignées cellulaires. Enfin les cibles de méthylation sont identifiées par immunoprécipitation de la marque m6A des ARN et séquençage dans nos lignées cellulaires.Nos résultats montrent à la fois chez l’homme et la souris, une diminution de la méthylation m6A dans les îlots diabétiques par rapport aux îlots sains. Les concentrations élevées en glucose modulent la méthylation m6A de la même manière probablement due à une augmentation de l’expression de la déméthylase ALKBH5 visible dans notre lignée cellulaire. Enfin l’utilisation d’inhibiteurs et de siRNA montre l’implication de la seconde déméthylase FTO dans la sécrétion d’insuline. De plus les résultats obtenus lors de l’immunoprécipitation de l’ARN indiquent que l’ARNm de l’insuline est méthylé dans la lignée bêta pancréatique.Ces résultats montrent donc l’importance de la méthylation m6A dans la fonction et l’identité de la cellule β. Cette régulation est probablement médiée par le glucose induisant des variations d’expression ou d’activité des déméthylases.