Title :

MicroPlate Sialyltransferase Assay: A Rapid and Sensitive Assay Based on an Unnatural Sialic Acid Donor and Bioorthogonal Chemistry

Author(s) :

Noël, Maxence [Auteur]
Unité de Glycobiologie Structurale et Fonctionnelle - UMR 8576 [UGSF]
Gilormini, Pierre-André [Auteur]
Unité de Glycobiologie Structurale et Fonctionnelle - UMR 8576 [UGSF]
Cogez, Virginie [Auteur]
Unité de Glycobiologie Structurale et Fonctionnelle (UGSF) - UMR 8576
Unité de Glycobiologie Structurale et Fonctionnelle - UMR 8576 [UGSF]
Lion, Cedric [Auteur]
Unité de Glycobiologie Structurale et Fonctionnelle (UGSF) - UMR 8576
Unité de Glycobiologie Structurale et Fonctionnelle - UMR 8576 [UGSF]
Biot, Christophe [Auteur]
Unité de Glycobiologie Structurale et Fonctionnelle - UMR 8576 [UGSF]
Unité de Glycobiologie Structurale et Fonctionnelle (UGSF) - UMR 8576
Harduin-Lepers, Anne [Auteur]
Unité de Glycobiologie Structurale et Fonctionnelle - UMR 8576 [UGSF]
Guerardel, Yann [Auteur]
Unité de Glycobiologie Structurale et Fonctionnelle (UGSF) - UMR 8576
Unité de Glycobiologie Structurale et Fonctionnelle - UMR 8576 [UGSF]

Journal title :

Bioconjugate chemistry

Volume number :

29

Pages :

3377-3384

Publication date :

2018-10-17

ISSN :

1043-1802, 1520-4812

HAL domain(s) :

Chimie/Chimie théorique et/ou physique

English abstract : [en]

Mammalian sialyltransferases transfer sialic acids onto glycoproteins and glycolipids within the Golgi apparatus. Despite their key role in glycosylation, the study of their enzymatic activities is limited by the lack of ...
Show more >Mammalian sialyltransferases transfer sialic acids onto glycoproteins and glycolipids within the Golgi apparatus. Despite their key role in glycosylation, the study of their enzymatic activities is limited by the lack of appropriate tools. Herein, we developed a quick and sensitive sialyltransferase microplate assay based on the use of the unnatural CMP-SiaNAl donor substrate. In this assay, an appropriate acceptor glycoprotein is coated on the bottom of 96-well plate and the sialyltransferase activity is assessed using CMP-SiaNAl. The alkyne tag of SiaNAl enables subsequent covalent ligation of an azido-biotin probe via CuAAC and an antibiotin-HRP conjugated antibody is then used to quantify the amount of transferred SiaNAl by a colorimetric titration. With this test, we evaluated the kinetic characteristics and substrate preferences of two human sialyltransferases, ST6Gal I and ST3Gal I toward a panel of asialoglycoprotein acceptors, and identified cations that display a sialyltransferase inhibitory effect.Show less >

Language :

Anglais

Audience :

Internationale

Popular science :

Non

Administrative institution(s) :

CNRS
Université de Lille

Collections :

• Unité de Glycobiologie Structurale et Fonctionnelle (UGSF) - UMR 8576

Research team(s) :

Régulation de la glycosylation terminale
Chemical Glycobiology

Submission date :

2020-02-12T15:45:37Z
2024-02-23T10:35:57Z