Rôle du domaine kinase de TRPM7 dans la transition épithélio-mésenchymateuse et la migration des cellules cancéreuses pancréatiques humaines

Abstract

Le cancer du pancréas est l’un des cancers les plus mortels dans le monde. Ce faible taux de survie s’explique en partie par la capacité des cellules cancéreuses pancréatiques à former des métastases. La migration et l’invasion cellulaires sont des étapes fondamentales de la cascade métastatique, et la compréhension de ces mécanismes est donc cruciale. Dans ce cadre, la protéine TRPM7 (Transient Receptor Potential Cation Channel Subfamily M Member 7), a été identifiée comme surexprimée de nombreux cancers, tels que le cancer du sein, du colon, des poumons ou encore dans le glioblastome. Notre équipe a été une des premières à démontrer la surexpression de TRPM7 dans les tissus cancéreux pancréatiques ainsi que son rôle dans la migration et l’invasion cellulaire. Toutefois, si le rôle du canal TRPM7 dans ces processus a été étudié, l’implication du domaine kinase dans le cancer du pancréas n’est toujours pas décrite.Ce travail a pour objectif d’élucider in vitro son rôle dans les capacités de migration, d’invasion et de transition épithélio-mésenchymateuse (TEM) des cellules cancéreuses pancréatiques. Les cellules cancéreuses humaines pancréatiques PANC-1 et MIA PaCa-2 ont été modifiées par CRISPR-Cas9 pour obtenir un modèle de délétion endogène du domaine kinase de TRPM7 (ΔK). Nous avons caractérisé ces modèles, en démontrant tout d’abord que l’absence du domaine modifie la sensibilité du canal au Mg2+ lié à l’ATP sans modifier sa sensibilité au Mg2+ libre ni son activité. La diminution de l’expression du domaine kinase entraine une diminution de la migration et également de l’invasion des cellules PANC-1. Nous avons également montré que la délétion du domaine kinase entrainait une augmentation de l’expression de la cadhérine-E de ainsi qu’une diminution de l’expression de la vimentine. Nos résultats in vivo démontrent également que le domaine kinase de TRPM7 dans les PANC-1 est impliqué dans la croissance tumorale. A l’inverse, lors de la diminution de l’expression du domaine kinase de TRPM7 dans les MIA PaCa-2, nous observons une augmentation de la migration et de l’invasion. En étudiant différentes protéines décrites dans les mécanismes d’invasion et de migration, nous observons une diminution de la phosphorylation de la protéine paxilline ainsi que l’expression des protéines Rac dans nos deux modèles. Ces premiers résultats démontrent pour la première du domaine kinase de TRPM7 dans les propriétés de migration et d’invasion des cellules humaines cancéreuses pancréatiques. En continuant nos travaux, nos résultats suggèrent que le domaine kinase de TRPM7 pourrait être un marqueur d’agressivité et une potentielle cible thérapeutique dans certaines formes d’ACP.